高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過程
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高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過程
一、制備MS固體培養(yǎng)基
實(shí)驗(yàn)室一般使用4℃保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備
1、配制各種母液。
配制母液時(shí)，大量元素濃縮 ，微量元素濃縮 。常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機(jī)物可以按照1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制母液。用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量。
2、配制培養(yǎng)基。
配制1LMS培養(yǎng)基時(shí)，先將稱量好的瓊脂加入800mL蒸餾水，加熱使瓊脂熔化，然后加入蔗糖30g,去配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。調(diào)節(jié)pH值，然后分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50或100mL
3、滅菌。高壓蒸汽滅菌
二、外植體消毒
選取菊花莖段時(shí)，要取 。
無菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料(外植體)的消毒滅菌。對培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方面要考慮_______________;另一方面還要考慮植物材料的__________。不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對待。一般情況下，細(xì)菌污染可能是由接種人員造成的，真菌污染可能是_________滅菌不當(dāng)。
三、接種
接種前，用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精將工作臺擦拭，然后點(diǎn)燃酒精燈。所有的接種操作必須在酒精燈旁進(jìn)行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼燒滅菌
四、培養(yǎng)
接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期消毒，溫度控制在18-22℃，并且每天用日光燈光照12h
五、移栽
移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日，然后用清水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或者珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中
六、栽培
每天要觀察記錄幼苗的生長情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開花
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