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        HPLC的常用術(shù)語解釋

        時(shí)間: 澤燕681 分享

          高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。它是在生化和分析化學(xué)中常用的柱層析儀。接下來小編為大家整理了HPLC的常用術(shù)語解釋,希望對(duì)你有幫助哦!

          第一部分 色譜曲線

          1、色譜圖(chromatogram):色譜柱流出物通過檢測器系統(tǒng)時(shí)所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)對(duì)時(shí)間或流動(dòng)相流出體積的曲線圖,或者通過適當(dāng)?shù)?a href='http://m.bingou.cc/way/' target='_blank'>方法觀察到的紙色譜或薄層色譜斑點(diǎn)、譜帶的分布圖。

          2、(色譜)峰(chromatographic peak):色譜柱流出

          3、峰底(peak base):峰的起點(diǎn)與終點(diǎn)之間的連接的直線

          4、峰高(h ,peak height):色譜峰最大值點(diǎn)到峰底的距離(圖1 中的BE)。

          5、峰寬(W ,peak width):在峰兩側(cè)拐點(diǎn)(圖1 中的F ,G)處所作切線與峰底相交兩點(diǎn)的距離

          6、半高峰寬(W h/2 ,peak withd at half height):通過峰高的中點(diǎn)作平行于峰底的直線,此直線與峰兩側(cè)相交兩點(diǎn)之間的距離(圖1 中的HJ)。

          7、峰面積(A ,peak area):峰與峰底之間的面積

          8、拖尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對(duì)稱的峰。

          9、前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對(duì)稱的峰。(又叫伸舌峰、前延峰)

          10、假峰(ghost peak):除組分正常產(chǎn)生的色譜峰外,由于儀器條件的變化等原因而在譜圖上出現(xiàn)的色譜峰,即并非由試樣所產(chǎn)生的峰。這種色譜峰并不代表具體某一組分,容易給定性、定量帶來誤差。(又叫鬼峰)

          11、畸峰(distrorted peak):形狀不對(duì)稱的色譜峰, 前伸峰、拖尾峰都屬于這類。

          12、反峰(negative peak):也稱倒峰、負(fù)峰,即出峰的方向與通常的方向相反的色譜峰。

          13、原點(diǎn)(origin):紙或薄層板上滴加試樣部位的中心點(diǎn)

          14、斑點(diǎn)(spot):平面色譜法中,組分在展開和顯譜后呈現(xiàn)近似圓形或橢圓形的色區(qū)

          15、區(qū)帶(zone):在色譜柱、紙或薄層板上被分離組分所占的區(qū)域。

          16、復(fù)斑(multiple spot):一種組分展開后形成兩個(gè)或多個(gè)清晰斑點(diǎn)。

          17、區(qū)帶拖尾(zone tailing):由于物理、化學(xué)等作用的影響,一種組分在展開后形成的彗星形狀斑點(diǎn)。

          18、基線(base line):在正常操作條件下,僅有流動(dòng)相通過檢測器系統(tǒng)時(shí)所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)曲線。

          19、基線漂移(baseline drift):基線隨時(shí)間定向的緩慢變化。

          20、基線噪聲(N ,baseline noise):由于各種原因而引起的基線波動(dòng)。

          21、統(tǒng)計(jì)矩(moment):色譜流出曲線是組分在檢測器中濃度或質(zhì)量依時(shí)間的統(tǒng)計(jì)分布曲線,響應(yīng)值對(duì)應(yīng)于分布密度。組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間 r 次冪的數(shù)學(xué)期望稱為流出曲線的 r 階原點(diǎn)矩。而組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間與平均遷移時(shí)間差的 r 次冪的數(shù)學(xué)期望稱為流出曲線的 r 階中點(diǎn)矩。

          22、一階原點(diǎn)矩(first origin moment):組分在柱內(nèi)遷移時(shí)間的數(shù)學(xué)期望。當(dāng)流出曲線為對(duì)稱峰時(shí),即為組分的保留時(shí)間。

          23、二階中心矩( μ2 ,second central moment):二階中心矩為流出曲線的方差。定義為:μ2=E(t-Et)2 式中,E代表平均。

          24、三階中心矩(μ3 ,third central moment):定義為:μ3=E(t-Et)3

          可以表示流出曲線的不對(duì)稱程度。峰形對(duì)稱時(shí)μ3=0,前伸峰μ3<0 ,拖尾峰μ3>0.

          第二部分 分離模式

          1、液相色譜法(liquid chromatography ,LC):用液體作流動(dòng)相的色譜法。

          2、液液色譜法(liquid liquid chromatography,LLC ):將固定液涂漬在載體上作為固定相的液相色譜法。

          3、液固色譜法(liquid solid chromatography,LSC ):用固體(一般指吸附劑)作為流動(dòng)相的液相色譜法。

          4、正相液相色譜法(normal phase liquid chromatography ,NPLC):固定相的極性較流動(dòng)相的極性強(qiáng)的液相色譜法。

          5、反相液相色譜法(reversed phase liquid chromatography,RPLC ):固定相的極性較流動(dòng)相的極性弱的液相色譜法。

          6、柱液相色譜法(liquid column chromatography ):在柱管內(nèi)進(jìn)行組分分離的液相色譜法。

          7、高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC ):具有高分離效能的柱液相色譜法。

          8、尺寸排除色譜法(size exclusion chromatography,SEC ):用化學(xué)惰性的多孔性物質(zhì)作為固定相,試樣組分按分子體積(嚴(yán)格來講是流體力學(xué)體積)進(jìn)行分離的液相色譜法。

          9、凝膠過濾色譜法:(gel filtration chromatography ):水或水溶液作為流動(dòng)相的體積排除色譜法。

          10、凝膠滲透色譜法:(gel permeation chromatography ,GPC):有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相的體積排除色譜法。

          11、親和色譜法(affinity chromatography ):用連接在基體上的配位體做固定相,使其與蛋白質(zhì)或其他大分子發(fā)生可逆的高選擇性的相互作用,利用不同親和力進(jìn)行分離的液相色譜法。

          12、離子交換色譜法(ion exchange chromatography ,IEC):以離子交換作用分離離子型化合物的液相色譜法。

          13、離子色譜法(ion chromatography ):以含有某種特定離子的水溶液作為流動(dòng)相,流出液通過抑制柱(或不通過抑制柱),在降低流動(dòng)相背景信號(hào)的條件下用于分離離子的液相色譜法。

          14、離子抑制色譜法(ion suppression chromatography ):通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的PH值來抑制試樣組分的電離,以分離離子型化合物的液相色譜法。

          15、離子對(duì)色譜法(ion pair chromatography ):用形成離子對(duì)化合物進(jìn)行分離的液相色譜法。16、疏水作用色譜法(hydrophobic interation chromatography ):用適度疏水性的固定相,以含鹽的水溶液作為流動(dòng)相,借疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。

          17、制備液相色譜法(preparative liquid chromatography):用能處理較大量試樣的色譜系統(tǒng),進(jìn)行分離、切割和收集組分,以提純化合物的液相色譜法。

          18、平面色譜法(planar chronatography):在平面介質(zhì)上進(jìn)行組分分離的色譜法,也叫平板色譜法。

          第三部分 常用術(shù)語

          M:分子量

          MC:二氯甲烷(methylene chloride)

          MeOH:甲醇(methanol)

          MS:質(zhì)譜

          h:峰高

          HPLC:高效液相色譜

          ID:內(nèi)徑,dC

          A:吸收度(式3.1,3.2);也作面積

          ACN:乙腈(acetonitrile)

          B(%B):二元流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑(% v/v)

          C8,C18:烷基鍵合相的鍵長度(八烷基或十八烷基)

          CD:環(huán)糊精(cyclodextrin)

          CV:變異系數(shù)(通常以%表示);式15.3

          dC:色譜柱內(nèi)徑(cm)

          dP:顆粒直徑(μm)

          DAD:二極管陣列檢測器

          EC:電化學(xué)(檢測器)

          F:流速(ml/min)

          FL:熒光(檢測器)

          GS:梯度斜度參數(shù)(式8.2a);k*=20/GS

          IEC:離子交換色譜(ion-exchange chromatography)

          IPC:離子對(duì)色譜 (ion-paire chromatography)

          k:保留因子(式2.4)

          k*:梯度洗脫中,k的有效值或平均值(式8.1)

          ka,kZ:色譜圖中,首峰(a)和末峰(z)的k值

          L:色譜柱長度(cm)

          LC-MS:液相色譜-質(zhì)譜

          MTBE:甲基-叔-丁醚(methyl-t-butyl ether)

          N:色譜柱塔板數(shù)(式2.82.8b)

          N:噪音(式3.3,圖3.3)

          NARP:非水反相HPLC

          NPC:正相色譜

          P:色譜柱壓力降(通常以psi表示)(式2.9)

          pKa:酸或供質(zhì)子堿的酸性常數(shù)

          PAH:多環(huán)芳烴(polyaromatic hydrocarbon)

          RS:分離度(式2.1)

          RI:折光指數(shù)

          RPC:反相色譜

          S:信號(hào);式3.3;圖3.3;以及由式6.1定義的參數(shù)

          tD:延遲或滯留時(shí)間(min,用于梯度洗脫中);等于VD/F

          tG:梯度時(shí)間(min)

          tR:保留時(shí)間(min)(圖2.2);等于tO(1+k)

          tRa,tRz:色譜圖中首峰(a)與末峰(z)的保留時(shí)間,tR(min)(圖8.6a)

          tO:色譜柱死時(shí)間(min)(式2.5)

          t1,t2:相鄰譜峰1與譜峰2的保留時(shí)間(min)

          TEA:三乙胺(triethylamine)

          THF:四氫呋喃(tetrahydrofuran)

          UV:紫外光譜

          VD:延遲或滯留體積(mL);為梯度混合器與色譜柱人口之間的體積(包括混合器的體積)

          Vm:色譜柱死體積(mL)(式2.6);Vm為色譜柱內(nèi)部的流動(dòng)相體積,不包括附于固定相上的溶劑

          Vmax:最大樣品體積(mL)(式13.1)

          Va:樣品體積(mL)

          w:重量(mg);也作半峰高處的峰寬(min)

          wmax:不超載色譜柱的最大進(jìn)樣量(mg)(式2.17)

          wS:色譜柱的飽和容量(mg)(式13.4)

          W:峰底寬(min)(圖2.2)

          Wth:大進(jìn)樣量對(duì)峰底寬的貢獻(xiàn)(min)(式13.2)

          WO:小進(jìn)樣量的峰底寬(min)

          W1/2:半峰高處的峰寬(min)(圖1.1)

          a:分離因子,等于k2/k1,其中k2與k1分別為相鄰譜峰2和譜峰1的k值

          △tR:tRz-tR(min)

          △%B:梯度洗脫期間,%B的變化

          ε:摩爾吸收系數(shù)

          εo:正相HPLC 中溶劑或溶劑混合液的強(qiáng)度

          η:粘度(CP)

          <<不常有符號(hào)>>

          A,B,C:式2.11中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨k值而變化,但改變其它條件或溶質(zhì)時(shí)基本不變

          A,B,C:式2.10中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化

          A,B,C:式2.10a中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化

          C:譜峰最大值處的濃度(mol/L)

          CO:注入樣品中溶質(zhì)的濃度(mol/L)

          GI:化學(xué)電離(MS)

          DGA:N,N-二甲基-1-萘酰胺;(也作二甲基苯胺dimethylaniline)

          EI:電子電離(MS)

          ELS:蒸發(fā)光散射擊(Evaporative light scattering)

          EtOAc:乙酸乙酯(ethyl acetate)

          FAB:快速原子轟擊(MS)

          FD:場解吸附(MS)

          h:折合板高,等于H/dP(式2.11)

          HB:羥基苯甲酸(hydrxybenzoic acid)(圖7.8,7.17與7.19)

          HFBA:七氟丁酸(hyptafluorobutyric acid)

          IPA:異丙醇(isopropanol)

          kW:以水作為流動(dòng)相的k值(式6.1)

          LCEC:液相色譜電化學(xué)檢測器

          LD:激光解吸(MS)

          LSIMS:液態(tài)二級(jí)離子質(zhì)譜

          MALDI:基質(zhì)輔助激光解吸電離

          MP:對(duì)羥苯甲酸甲酯

          [P-]m:流動(dòng)相中離子對(duì)試劑P-的濃度(mmol/L)

          PAD:脈沖電流分析檢測器

          PBP:極性鍵合相

          PD:等離子解吸(MS)

          PP:對(duì)羥苯甲酸丙酯

          PTH:乙內(nèi)酰苯硫脲

          R+,R-:分別為陰離子與陽離子離子交換色譜柱中的荷電功能基困(式7.4和7.5[如-N(CH3)3+和-SO3-]

          RF:響應(yīng)因子

          TBA+:四丁基銨離子

          tBME:見MTBE

          TMS:三甲基硅烷(trimethylsilyl;也為C1)

          TNB:1,3,5-三硝基苯(1,3,5-trinitrobenzene)

          TOF MS:時(shí)間飛行質(zhì)譜

          TSP:熱噴霧(MS)

          u:流動(dòng)相通過色譜柱的速度(cm/s);等于L/to

          V:峰底寬(mL)

          Vc:色譜柱內(nèi)峰展寬對(duì)V的貢獻(xiàn);也作小樣品量峰底寬(mL)(式2.16)

          VR:保留體積(mL)

          W:峰寬(min)(式2.12)

          Wc,WS,:分別為色譜柱,進(jìn)樣器,連續(xù)管和流通池對(duì)W的貢獻(xiàn)(min)

          Wlc,Wfc:(式2.12)

          X,X1,:無特征結(jié)構(gòu)的溶質(zhì)(圖7.8,7.17和7.19)

          X2,X3

          XB:流動(dòng)相中的B溶劑的摩爾分?jǐn)?shù)

          V:折合速度,等于udp/Dm(式2.11)

          б:高斯曲線的標(biāo)準(zhǔn)偏差;等于峰底的1/4

          ι:檢測器響應(yīng)時(shí)間常數(shù)(S)

          φ:流動(dòng)相中B溶劑的體積分?jǐn)?shù);等于0.0

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